Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1DF糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次消失掉甲自身抗纤到消失1同型高血压流行病学病因的成果部将在儿童一时期就有很好的详细描述，多个去甲自身抗纤阳性的儿童里有70%在血清反转后10年内患上高血压，而随访15年的儿童这一%减少到84%。比起之下，占流行病学1同型高血压一半以上的同型1同型高血压的确诊必要还没有人赢取必要的研究课题。

愈来愈多的人开始应用于仍须子系统来定义1同型高血压的成果：个纤在消失多种去甲自身抗纤时重回第1下一阶段，消失低血糖异常时重回第2下一阶段，消失病因时重回第3下一阶段。一些多发去甲自身抗纤阳性的个纤，在1期和2期，成果较比较慢，并转变为确诊的1同型高血压。我们之前详细描述了一两组在首次侦测到多种去甲自身抗纤样本后仅仅10年无高血压的亦然比较慢成果者，这两组患儿人数少，但特征非常明确。随后，我们见到去甲自身免疫特异性CD8+T细胞内反应将在成果亦然快的患儿里基本不存在，但在近期确诊和起因于的高血压患儿里很容易侦测到。这可能声称，与成果患儿比起，这些患儿自身免疫细胞将的可抑制向西移动。

后期研究课题声称，尽管可抑制性T细胞内(Treg)生产量不止现异常，但高血压患儿存在一些基本功能缺陷，其里包括对IL-2的反应将能力提高。此外，高血压患儿里的不稳定性将CD4+T细胞内可能对可抑制更具抵抗性，乏善可陈为不稳定性将T细胞内的可抑制向西移动，自然现象转化成的Treg和纤外转化成的诱导Treg，以及免疫经历的CD4+T细胞内里IL-2反应将向西移动。本研究课题的目的是详细描述了CD4+可抑制性T细胞内(Treg)在一小群亦然亦然快成果者里的特征，他们的平均比率为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

工具：BOX研究课题是一项以老年人依此的纵向研究课题，在21岁以下患病的患儿子女里安全检查1同型高血压的危险因素。我们之前详细描述了近十年亦然快成果者的特征，他们保持多重去甲自身抗纤阳性超过10年，但没有人消失高血压的流行病学病因，比较慢性或非顺利进行性自身免疫。随后，10名暂时保持无高血压并想提供大量血液样本的亦然快成果者设为T和B细胞内基本功能统计分析。在目前的研究课题里，8名比较慢成果者(SP两组)，里位比率43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的去甲自身抗纤阳性。所有的举例来说都处于1同型高血压成果的1期，尽管一些人随后失掉了去甲自身抗纤对某些免疫的阳性将，然而，一名患儿之前处于2期仅仅6年，但没有人消失流行病学病因，一名患儿被诊断为高血压，该受试者72岁，在采集实验样本时，其HbA1c上升时到53 mmol/mol(7%)，在科研人员里对该NAD顺利进行了单独评核能。复合外周血单个核能细胞内(PBMCs)，采用多参数流式细胞内绝技和T细胞内可抑制试验评核能NAD里Treg的频部将、表同型和基本功能。应用于FlowSOM和CITRUS(聚类全面性研究课题、表征和回归)顺利进行无监督聚类统计分析，评核能Treg表同型。

结果：与肥胖NAD比起，来自比较慢成果纤的梦境CD4+T细胞内的监督聚类推测，触发的梦境CD4+ Treg频部将减少，与糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白(GITR)隐含减少有关。一名HbA1c上升时的患儿与成果亦然快者和反转的对照两组比起，Treg谱不尽相同。基本功能统计分析声称，与肥胖NAD比起，来自亦然快成果纤的Treg介导的CD4+不稳定性将T细胞内可抑制相比来说损毁。乏善可陈为对不稳定性将CD4+T细胞内CD25和CD134隐含的可抑制减少。

三幅1 全面性的表同型统计分析推测，CD4+Treg亚同型在比较慢成果数据流里减少。由FlowSOM生成的Treg室，聚集在来自所有NAD的光阴CD4+CD45RA -细胞内上。根据标有物隐含全面性研究课题不止10个元簇:梦境T细胞内_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;梦境T cell_4;CD49b梦境T细胞内;HLA-DR + GITR +梦境T细胞内;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)应用于9个相异Treg标有生成的10个元簇的MST。每个数据流都是一个一个大(100个一个大)，较小的元一个大(10个元一个大)在数据流两组周围上色。每个数据流里的糕三幅指不止单个标有的隐含最高级别。(b)每个元聚类的热三幅，以推测整纤标有隐含。(c, d)为HD两组(c)和SP两组(d)生成三幅，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相比稀土元素为每个metacluster装有3](稀土元素> 0.05%)明确为HD和SP两组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +梦境T细胞内(h)、梦境T cell_1(i),梦境T cell_2 (j),梦境T cell_3 (k) n d CD49b梦境T细胞内(l)。蓝色带子都是**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon相加标记秩检验。此键适用于三幅形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

三幅2 应用于CITRUS的预测模同型猜测，Treg频部将的减少是成果亦然快的图案。分级暂时性(a - f)和柑橘统计分析(g-k)比较SP举例来说和反转的HD举例来说在CD4+CD45RA−T细胞内上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群纤的都是性三幅。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR隐含顺利进行复合，模拟FlowSOM群纤。(b) HD(黑点)和SP(黑斑)两组以及NADSP 606(蓝色)里CD25+ cd127的频部将简介三幅。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+暂时性集合的装有3];(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)柑桔簇锥形由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3隐含风力渐变，箭头突不止的簇被识别为SP和HD数据流之间的相异。(j)装有3]推测了在SP(黑斑)和HD(灰点)两组里，CITRUS梦境Treg_3和Treg_4的相比稀土元素(%)。(k)插值推测每个簇的表同型(深红色)和Treg标有相比隐含与历史背景隐含(红色);上列，寄存器Treg_3;下面一行，寄存器Treg_4。历史背景与所有其他簇里标有的隐含有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon相加标记秩检验

三幅3 与肥胖献血者比起，成果亦然快者梦境treg的GITR减少。每个梦境CD4+T细胞内元簇(梦境T细胞内_1;梦境T cell_2;梦境T cell_3;CD49b +梦境T细胞内;HLA-DR + GITR +梦境T细胞内;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)侦测每个隐含标有的改变。(a,b)来自HD (a)和S (b)数据流的隐含热三幅(sp606不包括在内)。(c,d)梦境Treg_4元簇里所有HD(灰色)、所有SP(红色)和SP 606(蓝色)的FlowSOM GITR隐含串联，推测插值(c)和简介三幅(d)。Wilcoxon相加标记秩和检验，p< 0.07(蓝色)所有NAD包括，p< 0.05(红色)NADSP 606和反转的HD不包括在测试里。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里GITR隐含，从分级暂时性，从所有HD(灰色)、所有SP(红色)和SP 606(蓝色)串联，推测插值(e)和简介三幅(f) *p< 0.05, Wilcoxon相加标记秩检验

三幅4 来自亦然快成果的CD4+ treg细胞内掌控不稳定性将CD4+T细胞内的能力提高。SP两组用红色的两条路线和带子指不止，HD两组用红色的两条路线和带子指不止，蓝色的两条路线/带子指不止NADsp606。应用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内顺利进行分选。CD4+CD25−(应将答者)被标有为CFSE, Treg按捕捉到的%硫酸铜。用抗CD3 /28微珠光阴化细胞内，培植3天内顺利进行流式细胞内绝技侦测。(a-d)与CD4+应将答者相比应将的treg培植(自纤)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD应将答者培植。(a,b,f) CFSE转化(a,e)和CFSE可抑制多于(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制多于。应用于阳性对照(触发的叛离将细胞内不含treg)计算可抑制多于。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差统计分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

三幅5 不稳定性将CD4+T细胞内对亦然快成果的T细胞内光阴化的可抑制更寻常。SP两组用红色的两条路线和带子指不止，HD两组用红色的两条路线和带子指不止，蓝色的两条路线/带子指不止NADsp606。应用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内顺利进行分选。CD4+CD25−(应将答者)被cfsel标有，treg按捕捉到的%硫酸铜。用抗CD3 /28微珠光阴化细胞内，培植3天内顺利进行流式细胞内绝技(CD25反染)和细胞内因子统计分析。HD Treg与HD、SP或sp606应将答者协力培植。(a,b) CFSE转化(a)和CFSE可抑制百分部将(b)。(c,d) CD25可抑制百分部将(c)和CD134可抑制百分部将(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培植里的隐含。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差统计分析。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论证：我们得不止的论证是，来自亦然快成果子的光阴化梦境CD4+Treg在GITR隐含里赢取了扩充和充沛，突显了进一步研究课题Treg在1同型高血压效用个纤里的差异性的必要性。

原文典故：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28